流式細胞儀(flow cytometer)是現代生物學研究不可或缺的利器,除了可鑑定細胞的標
記外,還可分析細胞的分裂週期、DNA 含量、細胞凋零死亡(apoptosis)、細胞內鈣離子的
濃度變化、pH 值之改變……等等。此外,流式細胞儀更可將細胞篩選出來,供進一步研究,
因此瞭解流式細胞儀的原理及用途,可為將來研究發展提供一個強而有力的利器。 Flow Cytometry 的基本原理
由上述可知,flow cytometry 技術主要是為了快速偵測一顆接著一顆流動於液體水柱
(fluid stream)中的顆粒或細胞,因此flow cytometry 所偵測的訊號是以一個(而非一群)
細胞或顆粒,被雷射光激發後產生的光學訊號,再轉換成電子訊號由電腦分析細胞或顆粒的
特性,此種儀器我們稱為FACS scanner。若加裝振盪的噴嘴(vibration nozzle)將水柱分裂
成細小且含有單一細胞的微細水滴,加上正或負的電荷,並利用高壓電場使水滴產生偏折,
則可篩選所要的細胞,此型機器稱為cell sorter 或FACS sorter。具有sorting 功能的機器一
定有scan 的功能,但具scan 功能的機器則不一定具有sorting 之功能。

光學及電子系統(optics and electronics)
當細胞或顆粒被雷射光激發後,則會產生0.5o– 5o 之前散射光(forward scatter, FSC)
及15o– 150o 之側散射光(side scatter 或 right-angle scatter 或SSC)。當顆粒本身帶有
螢光物質(fluorochrome),或被帶有螢光物質的抗體或被其它螢光物質染上的話,則會產
生波長不等的螢光(見圖四)。由於入射光的波長小於螢光的波長,因此由光的波長及強度
變化,即可測出顆粒的大小(與FSC 成正比),顆粒性(與SSC 成正比)與特定抗體或螢
光物質結合情形。例如細胞可被帶FITC(黃綠色螢光)的anti-CD3 抗體及帶PE(紅色螢
光)的anti-CD4 抗體結合,當細胞以波長488 nm argon laser 激發後,則除了FSC 及SSC
外,還會發出520 nm(FITC)及576 nm(PE)的螢光,這4 種波長及強度,則可透過一
連串的光學鏡片及偵測器,轉變成電子訊號,並以電腦加以記錄及分析,或可進一步依所
要求的參數(parameter)將細胞分離篩選(sorting)
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